濟南高壓滅菌是將待滅菌的物品放在一個(gè)密閉的加壓滅菌鍋內,通過(guò)加熱,使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中驅盡,然后關(guān)閉排氣閥,繼續加熱,此時(shí)由于蒸氣不能溢出,而增加了滅菌鍋內的壓力,從而使沸點(diǎn)增高,得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時(shí),滅菌鍋內冷空氣的排除是否*極為重要,因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓,所以,當水蒸汽中含有空氣時(shí),在同一壓力下,含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。所以飽和蒸汽的滅菌更*。
濟南高壓滅菌的流程:
1、排冷階段
抽真空排冷兩到三次,這種抽真空的做法是采用的脈動(dòng)真空滅菌技術(shù)而來(lái)的。先用真空泵抽凈滅菌鍋內的冷空氣,然后通入蒸汽,再次抽真空,如此重復操作兩到三次,一共30分鐘左右。
2、一計時(shí)階段
排凈冷空氣后進(jìn)入升溫階段,當滅菌鍋內溫度達到105℃時(shí),維持20分鐘。
3、二計時(shí)階段
一階段結束后繼續升溫,當滅菌鍋內溫度到達115℃時(shí),維持20分鐘。
4、三計時(shí)階段
二階段結束后繼續升溫,當滅菌鍋內溫度到達121℃時(shí),維持90-120分鐘。
5、降壓階段
三階段結束后,滅菌鍋所有閥門(mén)處于關(guān)閉狀態(tài),滅菌鍋壓力和溫度開(kāi)始下降,20分鐘后,開(kāi)始排氣,準備出鍋。
濟南高壓滅菌的注意事項:
1、汽未放盡前,不得開(kāi)啟高壓鍋;
2、如果滅菌后的培養基在鍋內不及時(shí)拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開(kāi),切忌將培養基封閉在鍋內過(guò)夜。
3、壓力表指針在0.05MPa以上時(shí),不能過(guò)快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從培養容器中溢出。
4、操作過(guò)程,請注意安全,小心燙傷。