濟南免疫親和柱是一種基于抗原-抗體特異性結合原理的高效目標分子提取技術(shù)。近年來(lái),它在生物工程、臨床醫學(xué)、環(huán)境監測等領(lǐng)域得到了廣泛應用。 一、原理
利用抗原與抗體之間的高度特異性結合。將特異性抗體固定在柱子的內表面,當含有目標抗原的樣品通過(guò)柱子時(shí),抗原與抗體結合形成復合物,從而實(shí)現目標分子的捕獲與分離。后續通過(guò)適當的洗脫條件,可以將目標分子從柱子上解離并收集。
二、制備
選擇合適的抗體:針對目標分子,選擇具有高特異性、高親和力的抗體。
抗體固定化:將抗體通過(guò)共價(jià)鍵合、吸附或包埋等方法固定在柱子的內表面,確保抗體在柱內的穩定性和重復使用性。
柱子填充與平衡:將固定化抗體填充到空柱中,然后用適當的緩沖液進(jìn)行平衡,確保柱子達到較佳的分離條件。
三、目標分子的提取步驟
樣品處理:根據目標分子的性質(zhì),對樣品進(jìn)行適當的預處理,如過(guò)濾、離心、濃縮等,以提高提取效率。
上樣:將處理好的樣品加載到濟南免疫親和柱上,使目標分子與柱內抗體結合。
洗滌:用適當的洗滌緩沖液沖洗柱子,去除未結合的雜質(zhì)分子。
洗脫:使用特定的洗脫緩沖液或競爭劑,將目標分子從柱子上解離并收集。
濃縮與純化:對洗脫得到的目標分子進(jìn)行濃縮和純化,以滿(mǎn)足后續實(shí)驗或應用的需求。
四、優(yōu)勢
高效:利用抗原-抗體特異性結合,可實(shí)現目標分子的高效提取。
純度高:通過(guò)特異性結合和洗滌步驟,可有效去除雜質(zhì),提高目標分子的純度。
操作簡(jiǎn)便:濟南免疫親和柱操作簡(jiǎn)單,易于掌握和推廣。